前情提要:有個又貴又好用的量測工具叫做 pipette。
這篇的確是深度圖(點頭),無論 pipette 再如何精準,實驗結果終究還是會被自己的無能毀掉阿......
#我們有實驗室粉絲嗎
#看著數據不知道自己過去八小時幹了什麼事
做實驗也有做實驗的沒有人愛......
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... 實驗室,我打算把所有pipette拆開檢查,零件該換的換, 該送校正的就送,我還把RAININ和GILSON說明書挖出來K了兩星期,然後我就把所有Pipette先用水測準度,P1000 ... ... <看更多>
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大家好,第一次在這裡發文請多指教> <
我是今年的碩一新生,最近在實驗室裡學習跑western
再跑之前有先去測蛋白質濃度,但測出來發現
我的standard做得非常不準...我的R值只有0.95.....(學長說要0.99才夠準)
但我在操作的過程中都有學長在旁檢視、提點,所以應該是沒有加錯東西
再討論過後推測可能是我的pipetman操作不當,量取不精準所致...
固定protein濃度後去跑膠,結果今天壓片出來,我的兩條band竟然差了快兩倍!!!
(一樣濃度應該要一樣粗啊> <)所以是我真的加得很不準= =a
可是我並非第一次接觸pipetman啊~大學時期曾待過實驗室一年
(不過以前實驗並沒有要求非常精準,所以可能問題一直存在只是我現在才發現= =)
也知道pipetman有兩段,第一段吸、第二段放...
我有先稍微爬了一下文,去看pipetman的操作
再由低轉到高時也會轉超過才轉至我要的值
跟學長姐討論後,他們說因素太多了,有可能是我吸放的速度太快
或是讓protein殘留在tip上過多...等,不過因為他們都沒有這樣的狀況
所以也不知道究竟問題在哪...(只有我有這樣的問題...我的手在搞甚麼啊QQ...)
目前是叫我就繼續多練習找找手感
不過我希望能降低失敗次數不要浪費前輩們的時間及老師的金錢> <
所以想請教各位(有人遇過這情形嗎T^T)在加東西的時候該怎麼加比較準確?
是先加在管壁上然後再離心?
還是要稍微碰到液面加?
亦或是要懸空加??
然後吸跟放的速度都是要慢一點???(不過我有時慢放又會有一點點液體倒吸回tip上ˊˋ)
我的問題好笨喔ˊˋ但還是懇請大家提供一點心得或意見...
感激不盡
謝謝: )
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